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- 実験医学別冊 疾患研究につながる オルガネラ実験必携プロトコール
商品情報
内容
ミトコンドリアをはじめオルガネラの機能解析に着手するにはこの一冊.自らに適した手法を選び実験を成功に導くためのノウハウを,エキスパートが惜しみなく解説.医学系研究者にも細胞生物学研究者にもおすすめ
序文
序文
オルガネラは細胞社会に発達したインフラである.インフラが異常となれば人間の社会活動に大きな支障をきたすのと同様に,オルガネラの機能不全は細胞の正常な活動を妨げ,さまざまな疾患の原因となる.オルガネラの機能を解析し,その状態を正しく知ることは,疾患の原因解明や治療法を確立するために不可欠である.
オルガネラ研究を専門としない研究者にとってオルガネラの機能解析は,知識や技術的な問題に加え,心理的にも大きなハードルがあるのではないだろうか.また特定のオルガネラの解析に豊富な経験をもつ研究者の中にも,専門としないオルガネラの解析に障壁を感じる人は少なくないだろう.本書では,ミトコンドリア,小胞体,ゴルジ体,エンドソーム・リソソーム(液胞)・オートファゴソーム,ペルオキシソーム,またこれらのオルガネラ間に形成されるオルガネラ膜コンタクトサイトについて章を設け,冒頭にそれぞれに関する概要をまとめている.普段, オルガネラ研究に携わっていない研究者や学生でも各オルガネラの基礎的な性質から最新の知見までを学べる構成となっている.また,本書の実験プロトコールは各オルガネラを専門とする第一線の研究者によって執筆されている.長年の経験に基づいた,高い専門性を有する実験プロトコールは,オルガネラ研究のエキスパートにとっても十分満足できる内容であると確信している.
かつてオルガネラは空間的に独立した構造体であると考えられていた.しかし現在では,複数のオルガネラが物理的に結合して,各々の状態を相互に感知し,状況に応じてオルガネラの機能を調節することがわかってきている.このようなオルガネラ像のパラダイムシフトによって,複数のオルガネラを同時に解析する必要性が増したことは間違いないだろう.編者の一人,田村が実際に携わった研究においても,もともとミトコンドリアの形態維持や,ミトコンドリアタンパク質の輸送に関与すると考えられていたタンパク質が,実は小胞体からミトコンドリアへの脂質輸送の実行因子であると判明したことがある.ミトコンドリアを対象にした研究であっても,ミトコンドリアとは異なる視点をもって研究する重要性を示す好例であると思う.本書が,読者の皆様の研究にオルガネラの視点を追加するきっかけとなれば幸いである.
最後に,ご多忙の中,執筆を快諾してくださった先生方,本書の企画を持ちかけてくださった羊土社の高木亮輔さんに心から感謝申し上げます.
2024年10月
田村 康,山野晃史
目次
はじめに【田村 康,山野晃史】
第1章 ミトコンドリア
1 概論―ミトコンドリアの多彩な機能と動的な構造変化【小笠原絵美,前田真希,石原直忠】
2 動物細胞からのミトコンドリア画分調製法とin vitro輸送アッセイ【花田有希,岡 敏彦】
3 ミトコンドリアダイナミクスの解析【石原玲子,石原直忠,石原孝也】
4 ミトコンドリアDNAの突然変異の病原性解析 〜DNA解析から膜電位・呼吸活性の評価まで【石川 香,玉城大敬,中田和人】
5 ミトコンドリアクリステの動態観察【多喜正泰】
第2章 小胞体
1 概論―小胞体の機能と品質管理システム【西頭英起】
2 小胞体環境を評価する【潮田 亮】
3 小胞体ストレス応答の活性化解析【濱田良真,三宅雅人,親泊政一】
4 小胞体関連分解ERADの解析方法【門脇寿枝】
第3章 ゴルジ体
1 概論―ゴルジ体の構造・機能・品質管理【吉田秀郎,佐々木桂奈江】
2 ゴルジ体のライブイメージング【戸島拓郎,中野明彦】
3 糖タンパク質におけるN型糖鎖修飾の構造解析【矢木宏和】
4 ゴルジ体関連分解GOMEDの解析方法【桜井 一,清水重臣】
5 ゴルジ体ストレス応答解析【佐々木桂奈江,吉田秀郎】
第4章 エンドソーム・リソソーム・オートファジー
1 概論―エンドソーム・リソソーム・オートファジーの機能【松井貴英,山本 林】
2 小腸上皮細胞におけるエンドサイトーシスの観察【白濱-野田佳苗,孫-和田戈虹,和田 洋】
3 液胞膜とオートファジックボディの単離方法【佐々木美智子,大隅良典,堀江-川俣朋子】
4 哺乳類オートファジーの純形態電顕解析とCLEM法【田村直輝,和栗 聡】
5 オートファジーの定量法【山本 林,白川麻耶】
6 ミトコンドリア選択的オートファジーの誘導と解析法【山野晃史】
第5章 ペルオキシソーム
1 概論―ペルオキシソームの機能と生合成機構【奥本寛治】
2 ペルオキシソームの形態・動態観察【杉浦 歩】
3 ペルオキシソームへのタンパク質輸送の解析【奥本寛治】
4 ペルオキシソームの脂肪酸β酸化活性の測定【奥本寛治】
第6章 オルガネラコンタクト
1 概論―オルガネラ膜間コンタクトサイト【田村 康】
2 ER-ミトコンドリアコンタクトサイトの定量と観察【渡邊征爾,酒井昭平,山中宏二】
3 CsFiNDを用いたオルガネラ間コンタクトサイト特異的な近接ラベリング手法【藤本慎太郎,田代晋也,田村 康】
4 電子顕微鏡によるER-ミトコンドリアコンタクトの定量的解析【青山幸恵子,齊藤知恵子,窪田芳之,平林祐介】
5 ER-ミトコンドリアコンタクトサイト画分の単離【椎葉一心】
6 小胞体・ミトコンドリア内腔のカルシウム動態の経時可視化解析【鈴木純二,金丸和典,飯野正光】
7 ER-ミトコンドリア間脂質輸送反応の解析【田村 康】
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書籍情報
- ISBN:9784758122757
- ページ数:319頁
- 書籍発行日:2024年11月
- 電子版発売日:2024年11月19日
- 判:B5判
- 種別:eBook版 → 詳細はこちら
- 同時利用可能端末数:3
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